适用性检查 取大肠埃希菌、金黄色球菌、铜绿假单胞菌各50～100cfu，分别注入无菌平皿中，立即倾注胰酪胨大豆琼脂培养基，每株试验菌平行制备2个平皿，混匀，凝固，置30～35℃培养48小时，计数；取白色nian珠菌、黑曲霉各50～100cfu，物体微生物限度检查报价，分别注入无菌平皿中，立即倾注沙氏葡萄糖琼脂培养基，每株试验菌平行制备2个平皿，混匀，凝固，置20～25℃培养72小时，计数；同时，用对应的对照培养基替代被检培养基进行上述试验。
根据药典要求，除和输液剂进行无菌检查外，其他非规定灭菌制剂及其原辅料都要进行一定限度的微生物检查，同时规定不得有控制菌的存在。非无菌产品（制剂）上市销售前，空气微生物限度检查报价，需在食品药品监督管理局备案，并提供三个不同批次的产品微生物限度检查及方法学适用性试验报告。
微生物限度检查法是检查非规定灭菌制剂及其原料、辅料受微生物污染程度的方法。检查项目包括细菌总数、霉菌数、酵母菌数及控制菌检查等。检查应在环境洁净度10000 级下的局部洁净度100 级的单向流空气区域内进行。检验全过程必须严格遵守无菌操作，防止再污染。单向流空气区域、工作台面及环境应定期按《工业洁净室（区）悬浮粒子、浮游菌和沉降菌的测试方法》的现行进行洁净度验证。
2.薄膜过滤法
除另有规定外，按计数方法适用性试验确认的方法进行供试液制备。取相当于1g、1ml或10c㎡供试品的供试液，若供试品所含的菌数较多时，可取适宜稀释级的供试液，微生物限度检查报价，照方法适用性试验确认的方法加至适量稀释液中，立即过滤，表面微生物限度检查报价，冲洗，冲洗后取出滤膜，菌面朝上贴于胰酪大豆胨琼脂培养基或沙氏葡萄糖琼脂培养基上培养。
培养和计数 培养条件和计数方法同平皿法，每张滤膜上的菌落数应不超100cfu。
菌数报告规则 以相当于1g、1ml或10c㎡供试品的菌落数报告菌数；若滤膜上无菌落生长，以lt;1报告菌数（每张滤膜过滤1g、1ml或10c㎡供试品），或lt;1乘以zui低稀释倍数的值报告菌数。
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